Proces tworzenia biofilmu bakteryjnego jest błyskawiczny, choć przebiega w kilku etapach.
Na początku pojedyncze bakterie lądują na powierzchni rany (adhezja). To moment, w którym jeszcze stosunkowo łatwo je usunąć w procesie zwykłego przemywania zranienia. Jeśli jednak te pojedyncze bakterie nie są usuwane, zaczynają produkować wspomnianą już lepką substancję, pod którą mogą się bezpiecznie namnażać. Biofilm staje się strukturą wielowarstwową (dojrzewanie). Bakterie w środku tej struktury przechodzą w stan uśpienia. To ich strategia przetrwania – skoro „śpią” i nie dzielą się, antybiotyki ich nie rozpoznają i nie mogą zniszczyć. Kiedy biofilm bakteryjny jest już dojrzały, fragmenty bakterii odrywają się od niego i wędrują w inne części rany, tworząc kolejne kolonie (ekspansja).
Wszystko to dzieje się bardzo szybko – w pełni dojrzały biofilm na ranie potrafi uformować się w 2-3 dni.